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高效液相色譜法檢測中藥中黃曲霉毒素B族和G族

發(fā)布時間:2024-06-21 來源:


中藥中黃曲霉毒素B族和G族的測定

摘要:本文參照2020版《中國藥典》中藥材黃曲霉毒素的測定方法,采用S6000-FL高效液相色譜儀對中藥樣品進行分析,結(jié)果顯示,該方案檢測限、定量限低,加標回收率滿足要求,方法重現(xiàn)性良好。本方案可為中藥中黃曲霉毒素B族和G族的測定提供參考。

關(guān)鍵詞:黃曲霉毒素B族  黃曲霉毒素G族  S6000-FL  

實驗條件及結(jié)果

供試品溶液的制備

取供試品粉末7.5 g50 mL的離心管中,加入1.5 g氯化鈉,精密加入70%甲醇37.5 mL,渦旋振蕩2 min,離心5 min,取上清液備用;準確移取 15 mL上述上清液,置于50 mL離心管中,加入35 mL的水,混勻,在4000 r/min下離心10 min,取上清液過免疫親和柱,收集全部洗脫液至試管中,渦旋混合,0.22 μ m 濾膜過濾,待測。

色譜條件

色譜條件:2020版《中國藥典》

   器:華譜S6000高效液相色譜儀-熒光檢測器-柱后光衍生器

柱:Tnature C184.6×250 mm5 μm

相:A:甲醇;B:乙腈;C

激發(fā)波長:360 nm;發(fā)射波長:450 nm

   溫:25 ℃

量:25 μL





1 黃曲霉毒素標準品與實際樣品色譜圖

線性、檢測限、定量限

2 黃曲霉毒素標準曲線圖

分別取黃曲霉毒素混合對照品溶液5、10、15、20、25 μL,按上述色譜條件進行分析,得到各黃曲霉毒素標準曲線,其線性相關(guān)系數(shù)均大于0.9999。以S/N=3為檢測限,S/N=10為定量限,測定黃曲霉毒素四個組分的檢測限和定量限。

1 黃曲霉毒素的線性、檢測限和定量限

名稱

檢測限

定量限

G2

0.01 μg/kg

0.04 μg/kg

G1

0.04 μg/kg

0.1 μg/kg

B2

0.01 μg/kg

0.04 μg/kg

B1

0.04 μg/kg

0.1 μg/kg

加標回收率

2 加標回收結(jié)果數(shù)據(jù)表(n=3,單點外標法)

名稱

加標量(ppb

回收率

RSD%

G2

1

98%

5.8

5

91.2%

0.9

10

103%

6.7

G1

1

93%

2.7

5

98.2%

2.6

10

104%

5.9

B2

1

101%

5.8

5

93.2%

0.5

10

107%

6

B1

1

97%

3.2

5

94.6%

0.7

10

104%

5.8

通過加標回收實驗來驗證方法準確度,分別做低、中、高、三個濃度的加標回收,按照上述方法進行分析,具體結(jié)果如表2所示。

結(jié)論

本文參照2020版《中國藥典》中藥材黃曲霉毒素的測定方法,采用S6000-FL高效液相色譜儀對中藥樣品進行分析,結(jié)果顯示,該方案檢測限、定量限低,加標回收率滿足要求,方法重現(xiàn)性良好。本方案可為中藥中黃曲霉毒素B族和G族的測定提供參考。



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